איך בוחרים צלחת אליסה?

ELISA עם תוצאה גרועה?עקוב אחרינו כדי לבחור את צלחת אליסה הנכונה.

בחירת צלחת ELISA מתאימה היא הצעד הראשון לניסוי ELISA מוצלח, אך אנשים רבים מתעלמים מכך. כאשר אנשים עורכים ניסויים, הם לרוב שוקלים רק את הניסוי עצמו, אך אינם יודעים שלעתים קרובות יש למוצר השפעה רבה על הניסוי. בחירה נכונה של מוצרים תתרום להצלחת הניסוי. בדרך כלל אנו לוקחים בחשבון את הגורמים הבאים בעת ביצוע ניסויי ELISA:

1.צורת התחתית

נכון לעכשיו, היצרנים מתכננים את הבארות המסומנות באנזים כעמודות עצמאיות, ומגדילים בצורה מתאימה את המרחק בין הבארות כך שניתן להפריד אותן באופן עצמאי, ובכך למזער זיהום צולב. לסוגים שונים של צלחות אליסה יש צורות שונות של תחתית הבאר. להלן כמה צורות נפוצות לתחתית חורים:

תחתית שטוחה: התחתית היא אופקית, הנקראת גם תחתית F. האור לא יוסט דרך התחתית, שיכולה להעביר את האור במידה הרבה ביותר. השתמש עבור ניסויים הדורשים תחתית עגולה מטעמי נראות או סיבות אחרות.

תחתית עגול: ידוע גם בשם U-bottom, מספק את תוצאות הניקוי הטובות ביותר וביצועים היברידיים, מתאים ליישומים שצריכים לבדוק משקעים.

תחתית C: זה יכול לספק אפקט ניקוי טוב בין התחתית השטוחה לתחתית העגולה, תוך שילוב היתרונות של התחתית השטוחה.

Cone Bottom: ידוע גם בשם V-bottom, הוא מתאים לדגימה מדויקת ואחסון של דגימות מיקרו להחלמה מיטבית של נפחים קטנים.

2. הצבע של צלחת אליסה

ישנם שלושה צבעים של צלחת אליסה: שקוף, שחור ולבן.

רוב ELISA בוחרים בצלחות שקופות כחומרי ניסוי. לוחות אליסה לבנים ושחורים משמשים בדרך כלל לזיהוי זוהר. לוחית ה-ELISA השחורה עצמה סופגת אור, ולכן האות שלה חלש יותר מזה של לוחית ה-ELISA הלבנה. לוחות אליסה שחורים משמשים בדרך כלל לזיהוי אור חזק יותר, כגון זיהוי פלואורסצנטי; להיפך, לוחות אליסה הלבנים יכולים לשמש לזיהוי אור חלש יותר, והם משמשים לעתים קרובות לפיתוח כימי-אור כללי ופיתוח צבע מצע (כגון לוציפראז כפול). ניתוח גנים של כתב).

3. החומר של צלחת אליסה

החומרים הנפוצים הם פוליאתילן (PE), פוליפרופילן (PP), פוליסטירן (PS), פוליוויניל כלוריד (PVC) ופוליקרבונט (PC).

החומרים הנפוצים ביותר ב-ELSIA הם פוליסטירן ופוליוויניל כלוריד. לוח רך של פוליוויניל כלוריד דק, ניתן לחיתוך, והמחיר נמוך. החיסרון הוא שהגימור אינו טוב כמו לוח הפוליסטירן, ותחתית החור אינה שטוחה כמו קלקר. אבל גם ערך הרקע המתאים יגדל. בדרך כלל, טיפול השתלת יונים מתבצע על פני צלחת ה-ELISA, וקבוצות פונקציונליות פעילות כגון קבוצות אלדהיד, קבוצות אמינו וקבוצות אפוקסי מוכנסות למשטח הפולימר כדי לשפר את הביצועים של משטח המצע.

4. מנגנוני כריכה שונים

קשירה יעילה של חומר הציפוי למשטח התחתון של הצלחת היא שלב מכריע ב-ELISA. לכן, יש לנתח בקפידה את המאפיינים המבניים והתכונות הכימיות של החומר המיועד לציפוי לפני הניסוי כדי לבחור צלחת אליסה מתאימה. באופן כללי, ישנן מספר דרכים לקשירת חומר הציפוי לתחתית הצלחת: ספיחה פסיבית, קשירה קוולנטית ולכידת זיקה.

ספיחה פסיבית: מנגנון הספיחה הפסיבית מורכב, והקישור בין חומר הציפוי לתחתית הצלחת מסתמך בעיקר על כוחות בין-מולקולריים (כוח ואן דר ואלס) וקשרי מימן. ברוב ה-ELISA, הקישור של חומר הציפוי לתחתית הצלחת מתבצע על ידי ספיחה פסיבית. בדרך כלל, הקישור בין אנטיגנים (או נוגדנים) במשקל מולקולרי בינוני וגדול לבין תחתית הצלחת מתבצעת על ידי ספיחה פסיבית. המאפיינים ההידרופוביים/הידרופיליים של המשטח התחתון של הצלחת נלקחים לעתים קרובות בחשבון בעת ​​בחירת צלחת אליסה. הטבלה הבאה מפרטת את היקף היישום והשימוש של משטחי מצע הידרופיליים שונים:

לכידת זיקה: לכידת זיקה מבוססת על קישור ספציפי של מקרומולקולות מסומנות לקולטנים המתאימים להן. ניתן להשיג מקרומולקולות מתויגות על ידי צימוד כימי או על ידי הנדסה גנטית.

התכונות של לכידת זיקה הן:

1. ספציפיות גבוהה

2. יכול לשפר את יחס האות לרעש של תוצאות המדידה

משטחי התחתית הנפוצים יותר הם: משטח מצופה streptavidin (streptavidin); משטח מצופה ניקל צ'לט (Nickel Chelate) ומשטח מצופה גלוטתיון (Glutathione, GSH).

3. משטח Streptavidin: הזיקה והספציפיות הגבוהה של Streptavidin וביוטין משמשים למימוש הקישור של הצלחת התחתונה לחלבון המצופה.

4. משטח ניקל chelate: ניקל chelate מחובר למשטח הפולימר כדי לקשור חלבוני היתוך עם תגיות His (Histidine).

5. משטח גלוטתיון: שימוש בספציפיות של אנזים וסובסטרט בין גלוטתיון וגלוטתיון sulfhydryltransferase (GST) להשגת קשירה של הצלחת התחתונה לחלבון המעיל.

למה לבחור בצלחת BKMAM אליסה?

1. עשוי מ-100 אחוז חומר פוליסטירן,
   

2. מתאים לתרבית תאים דביקים,

3. בסיס שטוח, עובי אחיד וגודל אחיד עבור עמודי תגובה,

4. סטרילי עם אריזה אישית,

5. באיכות גבוהה עם מחיר מפעל.