חברים שעושים ניסויים הקשורים לתאים חייבים לעתים קרובות להשתמש בשיטות הקפאת תאים. בקיצור, אחסון קפוא בתאים נועד לשמור תאים בסביבה בטמפרטורה נמוכה כדי להשיג את המטרה של שימור לטווח ארוך. לתאים תהיה מידה מסוימת של מוטציה במהלך תהליך ההעברה. על מנת להבטיח שעדיין ניתן להשתמש בתאים במקרה של זיהום תאים ומוטציה, חלק מהתאים משמשים בדרך כלל להקפאה.
העיקרון של הקפאת תאים
עיקרון אחד בתהליך הקפאת התאים וההחלמה הוא "איחוי קפוא איטי" על מנת להציל את חיוניות התאים למקסימום. במילים פשוטות, זה צריך להיות איטי כשהוא קפוא ומתקרר, והוא צריך להתחמם במהירות כאשר הוא מתאושש מטמפרטורה נמוכה. הסיבה להקפאה איטית היא שאם התאים ממוקמים ישירות בסביבת טמפרטורה נמוכה במיוחד כמו חנקן נוזלי, התאים יוצרים גביש קרח גדול, שיפגע בתאים.
אם מקפיאים אותו לאט, התאים יכולים להתייבש לאט כדי להשיג את מטרת ההגנה על התאים. בנוסף, כאשר מתאוששים, זה גם כדי למנוע מגבישי קרח קטנים ליצור גבישי קרח גדולים, כלומר, גבישים כבדים של גבישי קרח. לכן, כאשר כולם בדרך כלל עושים הקפאת תאים, זה תמיד גורם לתאים לסבול מהפסדים, אשר צפויים להשפיע בשלב ההקפאה.
מספר שיטות להקפאת תאים
שיטה ידנית: תא קפוא מאוחסן בדרך כלל בחנקן נוזלי. שיטת הפעולה הידנית היא קירור השיפוע במקרר. שמור את התאים בצינור האחסון הקפוא, והנח אותם בסביבת מקרר של 4 מעלות C, -20 מעלות C, -80 מעלות C לפי הסדר. קפוא למשך 24 שעות ב--80 מעלות צלזיוס לפני ההעברה לחנקן נוזלי. קירור ידני אינו דורש תוספות נוספות של חומרים מתכלים אחרים. ניתן להפעיל אותו באופן ידני. זה הכי פשוט, אבל זה לא פשוט. הפעולה בפועל מטרידה. והאפקט לא ממש טוב, כי שיטת הקירור הזו עדיין לא אחידה, והיא לא בהכרח ישימה לתאים שבירים יותר.
תיבת קירור שיפוע: קופסת הקירור שיפוע הנמכרת בשוק משמשת במיוחד לקירור אחיד של תהליך ההקפאה. מהירות הקירור היא בדרך כלל -1 מעלות לדקה. הכניסו את צינור האחסון הקפוא לתוך קופסת הקירור השיפוע והניחו את קופסת הקירור השיפוע ישירות בסביבת המקרר של -80 מעלות צלזיוס כדי לבלות את הלילה ללא פעולת שיפוע ידנית. לאחר מכן הורידו את צינור ההפקדה והכניסו אותו לחנקן נוזלי. ההשפעה של שימוש בקופסאות קירור שיפוע טובה יותר, מכיוון שקופסאות קירור מסחריות בשוק יכולות להבטיח קצב קירור אחיד בערך.
ישנן שתי קופסאות קירור שיפוע נפוצות בשוק. צורך להוסיף איזופרופיל, בדרך כלל גוף קופסת PC. בעת השימוש, הוספת איזופנול לקו קנה המידה בקופסה בעת השימוש בו. האיזופרופנול משמש כנשא לאחסון והפצת חום.
סוג נוסף אין צורך להוסיף עם איזופרופיל, מקצף, וניתן להציב את המקפיא ישירות במהלך השימוש, וזה נוח יותר לתפעול.
את קופסת הקירור של איזופרופנול מומלץ להחליף את הנוזל לאחר שימוש בו מספר פעמים, אך מכיוון שאיזופרופנול הוא נוזל מזיק, הגורם לפגיעה בניסויים ובסביבה, לרוב ניתן להשתמש בו מספר פעמים. עם זאת, יש צורך לוודא כי הנוזל הוא בכמות מסוימת.
אחסון קפוא לא מתוכנת: השתמש בנוזלים קפואים שאינם מתוכנתים שניתן לרכוש בשוק. בהשוואה לנוזל הקפוא המסורתי, הרכיב הפנימי יכול להפחית את הנזק לתאי גביש הקרח, כך שאין צורך להשתמש בשיפוע להתקררות, וגם לא מצריך את קופסת הקירור הגרדיאנט. אחסון קפוא יכול להיות ממוקם ישירות בסביבת מקרר של -80 מעלות צלזיוס.
דגימות תאים רבות יקרות מאוד. בנוסף אלינו, עלינו להשתמש בו בעת ביצוע ניסויים. אתה גם צריך לבחור מוצרים טובים ככל האפשר בבחירת מוצרים קשורים. בחר את צינור האחסון הקפוא עם איכות מוסמכת, נסה להשתמש בכלי קירור השיפוע להקפאה, ומקסם את הערבות לנזק נמוך לתאים כדי למנוע אובדן קטן עקב מינור.